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新牧1号苜蓿抗逆相关基因MvNHX1启动子表达载体的构建

更新时间:2015-11-03

【摘要】为了进一步研究新牧1 号苜蓿抗逆相关基因MvNHX1启动子的功能,采用双酶切的方法,用核酸内切酶Sac1和Nco1分别双酶切pCAMBIA1304 质粒和阳性重组质粒pEASY-T1-simple- pMvNHX1,然后回收目的片段。通过T4DNA 连接酶将目的片段和空载体相连后获得连接产物。将连接产物导入到宿主菌DH5α,通过画板,卡那霉素筛选后挑单菌落摇菌。然后用菌液PCR 及双酶切鉴定该载体后,用冻融法将其导入农杆菌EHA105。结果表明,成功培养出含有抗逆相关基因MvNHX1启动子pMvNHX1∶GUS∶EHA105 的菌落;成功构建出新的植物表达载体pMvNHX1∶GUS。

【关键词】

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